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ELISA試劑盒研究的一般工具與方法

2014-07-25 [1021]

隨著人類基因組計劃取得巨大的成功和許多物種基因組測序的完成,僅僅靠基因組的序列來試圖闡明生命現(xiàn)象是遠遠不夠的,因此,ELISA試劑盒研究重心已經(jīng)開始從揭示生命的所有遺傳信息轉(zhuǎn)移到在分子整體水平對功能的研究上,生命科學已實質(zhì)性地跨入了后基因組時代。
盡管現(xiàn)在已經(jīng)有多個物種的基因組被測序,但這些基因組中通常有一半以上基因的功能是未知的。
ELISA試劑盒目前功能基因組研究中所采用的策略,如微陣列法(microarray)(Wodicka et al.,1997)、基因芯片(gene chips)(Ramsay et al.,1998)、基因表達序列分析(SAGE)(Velculescu et al.,1995)等,都是從細胞中mRNA的角度來考慮的。但事實上,從DNA、mRNA到蛋白質(zhì)存在三個層次的調(diào)控,mRNA自身也存在著貯存、轉(zhuǎn)運和降解等問題,從mRNA角度考慮,實際上僅包括了轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控,并不能全面代表蛋白質(zhì)表達水平。實驗也證明,組織中mRNA豐度與蛋白質(zhì)豐度的相關性并不好,尤其對于低豐度蛋白質(zhì)來說,相關性更差。蛋白質(zhì)復雜的翻譯后修飾,蛋白質(zhì)的亞細胞定位或遷移,蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用則幾乎無法從mRNA水平來判斷(曾嶸,夏其昌,2002)。新生肽鏈合成后存在多種加工、修飾過程,蛋白質(zhì)間也存在類似于mRNA分子內(nèi)的剪切、拼接,研究證明基本元件“intein”廣泛存在于蛋白質(zhì)中(Perler et al.,1997)?;蚺c其編碼產(chǎn)物蛋白的線性對應關系只存在于新生肽鏈而不是zui終的功能蛋白質(zhì)中。
ELISA試劑盒是生理功能的執(zhí)行者和生命現(xiàn)象的直接體現(xiàn)者,對蛋白質(zhì)結構和功能的研究將直接闡明生命在生理或病理條件下的變化機制;蛋白質(zhì)本身的存在形式和活動規(guī)律,如翻譯后修飾、蛋白質(zhì)間相互作用及蛋白質(zhì)構象等問題,仍依賴于直接對蛋白質(zhì)的研究來解決。因此要對生命的復雜活動有全面和深入的認識,必然要在整體、動態(tài)、網(wǎng)絡的水平上對蛋白質(zhì)進行研究

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