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培養(yǎng)大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞的技術

2016-12-30 [1190]

很多細胞因子對于轉(zhuǎn)化的細胞及病毒感染的細胞具有溶細胞或按捺細胞成長的活性。常用的檢查細胞增殖的辦法有3H-TdR摻人法、比色法、染色法和直接計數(shù)法等。檢查細胞因子促成長活性或按捺成長活性是將不一樣稀釋度的待測樣品或細胞因子規(guī)范品與培育的細胞株一起培育必定時刻,然后檢查增殖的細胞數(shù)。此外,測定代謝產(chǎn)品熒光強度的辦法也可檢查增殖細胞數(shù),如ATP法和cAMP法。檢查細胞因子溶細胞八田胞毒活性或按捺成長活性是將不一樣稀釋度的待測樣品或細胞因子規(guī)范品與培育的細胞株一起培育必定時刻,然后檢查存活的靶細胞數(shù),并與對照對比求得溶細胞或按捺細胞成長的百分率,或以OD值對樣品稀釋度作圖,繪制規(guī)范品的劑量反響曲線,從曲線上求得相應的待測樣品的含量。生物學活性檢查法所用的靶細胞可直接從組織中別離,如骨髓細胞的集落構(gòu)成實驗和胸腺細胞(脾細胞)的增殖實驗,或用體外培育的依靠細胞因子才干成長的細胞因子依靠株及對細胞因子殺傷靈敏的細胞作為靶細胞。細胞因子還能誘導靶細胞表達某些外表分子或分泌一些蛋白質(zhì),可以用熒光素標記抗體檢查表達相應分子的細胞數(shù),或用特定辦法測定細胞分泌的蛋白質(zhì),直接了解細胞因子的活性。

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